尼羅紅熒光染色溶液是一種旨在通過與脂類物質(zhì)的結(jié)合并發(fā)出熒光檢測信號，快速、敏感、可靠地活體定量測定細(xì)胞內(nèi)脂類成分的常用熒光染料。適用于各種細(xì)胞包括細(xì)菌細(xì)胞，也用于蛋白質(zhì)電泳染色。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，即到即用，性能穩(wěn)定，著色清晰靈敏。
尼羅紅染色劑（9-diethylamino-5H-benzo[alpha]-phenoxazine-5-one；Nile red）是一種親脂性的惡嗪類熒光染料。與脂類物質(zhì)包括臘酯（wax ester）和三酰甘油（triacylglycerol）以及各種脂肪酸結(jié)合后，在激發(fā)波長543nm的激發(fā)下，顯示強(qiáng)烈桔紅色熒光（散發(fā)波長598nm）。同時(shí)在紫外光的照射下顯示紅色。
1. 開啟熒光顯微鏡
2. 小心抽掉25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)液
3. 加入3毫升用戶自備的HANK平衡鹽緩沖溶液或PBS緩沖溶液到細(xì)胞培養(yǎng)瓶，覆蓋培養(yǎng)瓶表面
4. 小心抽掉清洗液，加入染色工作液
5. 在37℃培養(yǎng)箱孵育10分鐘，避免光照
6. 在熒光顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞。
樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運(yùn)輸送樣。
切勿固定時(shí)間過長，切勿冷凍結(jié)冰。
